Evelina Galli Wikipedia – Människor du inte kände var vänliga med andra du kände. Pernilla Wahlgrens status som Bianca Ingrossos mamma är en av de där kändisfamiljerna som alla känner till. Ändå är dessa kändisar som du förmodligen inte visste var i ledarband med varandra.
Har du någon gång suttit och tittat på ett SVT-program med Kalle Zackari Wahlström och tänkt: “Han pratar på ett riktigt bekant sätt”? Likheten mellan honom och… Vem är Erik Haag? Jo, han gör det; i själva verket är de två halvbröder. Både Kalle Zackari Wahlström, 39 år, och Erik Haag, 53 år, delar samma mamma men olika pappor.
Är de avslappnade nu? Ja, Gry Forssell, 47, är bror till radiopersonligheten Johannes Brost, 72, som tragiskt gick bort i cancer 2018. Grys pappa, musikern Tomas Forssell, är halvbror Johannes Brost. Även om de alltid hade vetat om varandras existens lärde sig Johannes och Thomas inte känna varandra förrän de var vuxna och träffades på ett pissoar. När de äntligen träffades ansikte mot ansikte dog gnistan mellan dem.
Den 39-åriga Josephine Bornebusch och den 42-åriga Claudia Galli Concha är inte bara lagkamrater på isen, utan även slackers. Ändå kan kusinas inte tros trots deras liknande åldrar. I själva verket är Josephines mesta Claudia. Claudia är verkligen en trög person, och en av hennes äldre sycophants är scendesignern Cian Bornebusch, som också är Josephines mamma.
Tills prins Daniel, nu 47, gav sig åt kronprinsessan Victorias vård var han bara en vanlig kille från Ockelbo som tänkte åka på semester. Prins Daniel är enligt uppgift i ett romantiskt förhållande med OS-guldmedaljören i slalom, Frida Hansdotter, 35. Fridas pappa var en bror till Daniels pappa, och Daniels mamma, Ewa Westling, är också släkt med Fridas mamma genom en gemensam förfader.
Janet Leigh och Jamie Lee Curtis
Den berömda skådespelerskan Jamie Lee Curtis är dotter till Janet Leigh, som spelade huvudrollen i Psycho. Curtis är mest känd för sina roller i Freaky Friday och A Fish Called Wanda. Hollywoodlegenden Melanie Griffith är mamma till Dakota Johnson, som spelar Anastasia i “50 Shades of Grey”. Melanie fick en dotter med exmaken Don Johnson innan hon gifte sig med Antonia Banderas 1995 och fick två barn med henne.
Det är ett bra ställe för kockarna att bråka om vem som förtjänar fler Oscars. Marisa Tomei och Julianne Moore, båda Oscarsvinnare, är kusiner som har vunnit sin beskärda del av gyllene statyetter. Ändå insåg de inte att de var kusiner förrän för några år sedan, och de två spelade mot varandra i filmen Crazy Stupid Love innan de kom på det.
Nej, Ralph Fiennes, som spelade Lord Voldemort i Harry Potter-filmerna, är inte prins Charles sedan länge förlorade halvbror. Ändå är de faktiskt åttonde kusiner, med gemensamma anor som går tillbaka till kung James II av Skottland på 1460-talet. Det finns inget blodsband mellan Grey’s Anatomy-stjärnan Jessica Capshaw och regissören Steven Spielberg, men de två är ganska nära varandra. 1991 välkomnade Spielberg sin fru, skådespelerskan Kate Capshaw, och deras dotter, Jessica, i familjen.
Christian Bale, som spelar Batman, är inte vän med Gloria Steinem, en feministisk ikon. Christian Bales far, David Bales, var gåva med henne under de sista åren av sitt liv, och Steinem blev ett Hollywood-power couples go-to matriark. Kärnutrustning för membranfusion under intracellulär vesikulär transport är lösliga N-etylmaleimidkänsliga fusionsproteinfästproteinreceptorer (SNARE). Tidigare forskning har lokaliserat målet SNARE synaptosom-associerat protein på 23 kDa (SNAP23) vid plasmamembranet, där det deltar i exocytotisk membranfusion.
Här ger vi bevis för att SNAP23 i fibroblaster i primärkultur och HeLa-celler interagerar med vimentinfilament i en Triton X-100 olöslig fraktion. När humana fibroblaster exponeras för N-etylmaleimid frisätts SNAP23 från vimentinfilament och associeras med syntaxin 4, ett annat SNARE-protein som finns i plasmamembranet. Följaktligen kan fibroblasters SNAP23-pool associerad med vimentin fungera som en källa för plasmamembranets fusionsmaskineri. Vårt fynd tyder på att mellanliggande filament spelar en roll som inte har undersökts helt.
INTRODUKTION
Synaptosomalt associerat protein på 25 kDa (SNAP25) (Ravichandraet al., 1996) är en komponent i hela neuronala plasmamembranet, och SNAP23 är en allmänt uttryckt isoform av SNAP25 (Oyler et al., 1989; Galli et al., 1995 ). Genom att bilda ett ternärt komplex med syntaxin 1, ett annat neuronalt plasmamembranprotein och synaptobrevin 2, en synaptisk vesikel SNARE, fungerar SNAP25 som ett mållösligt N-etylmaleimid-känsligt fusionsprotein (SNAP) vidhäftningsprotein (t-SNARE) (Sollner et al. ., 1993).
Lipiddubbelskiktsfusion förmedlas av trans-SNARE-komplexbildning mellan angränsande membran (Weber et al., 1998; Bock och Scheller, 1999; Nickel et al., 1999). I epitelceller är SNAP23 engagerad i exocytos vid både de apikala och laterala plasmamembranen (Galli et al., 1998; Leung et al., 1998; Low et al., 1998a; Lafontet al., 1999). Ickepolariserade celltyper såsom mastceller (Guo et al., 1998), adipocyter (Foster et al., 1999) och blodplättar involverar alla SNAP23 i granulexocytos (Chen et al., 2000).
Inriktning av SNAP25 och SNAP23 till plasmamembranet är inte väl förstått, inte heller mekanismen och regleringen av denna process. De centrala cysteinresterna av dessa proteiner måste vara palmytoylerade (Gonzalo och Linder, 1998; Gonzalo et al., 1999), men fosforylering av SNAP-kinas (Cabaniols et al., 1999) och kontakt med ett plasmamembransyntaxin (Veit, 2000) är också nödvändiga.
En Triton X-100 olöslig fraktion inklusive SNAP23 och cytoskelettkomponenter har visats existera (Guo et al., 1998; Foster et al., 1999). Här visar vi att fibroblaster odlade i primärkultur har en cytoskelettassocierad pool av SNAP23 som är kopplad till vimentinfilament och kan rekryteras för att bilda SNARE-komplex vid plasmamembranet.
INNEHÅLL OCH FÖRSÄTTNINGAR
Celler
Embryonala musfibroblaster, humana fibroblaster och HeLa-celler användes alla. Dr. G. de Saint Basile (Hôpital Necker Enfants Malades, Paris, Frankrike) försåg oss vänligt med humana fibroblaster, som vi odlade i RPMI 1640, 10 % fetalt kalvserum, 5 mM glutamin. Musfibroblaster med vildtyp och vimentindeletion isolerades från E13.5-embryon och odlades i Dulbeccos modifierade Eagles media kompletterat med 10 % fetalt kalvserum, 5 mM glutamin och 1 mM natriumpyruvat som tidigare beskrivits (Gillard et al., 1998) .
Antikroppar
Anti-SNAP23 rekombinant protein (TG7), anti-Nter peptid (Nter, 1-17 rester; en gåva från Dr. P. Roche, NIH, Bethesda, MD; Low et al., 1998b), anti-peptid (rester 196 -211; Synaptic Systems, Göttingen, FRG), och musantikroppar mot -tubulin (klon tub2.1; Sigma, St. Louis (PBS).
Både rhodamin- och Texas Red-kopplad anti-kanin F(ab′)2 (båda från Jackson Laboratories) och Alexa 488-kopplad åsna-antimus (båda från Sigma) användes som sekundära antikroppar (Molecular Probes, Leiden, Nederländerna ). Anti-mus- och anti-kanin-antikroppar konjugerade till pepparrotsperoxidas köptes från Jackson Laboratories.
Immunfluorescens
Celler odlades på täckglas, fixerades sedan i metanol vid 20°C i 3-5 minuter, permeabiliserades med 0,2 procent bovint serumalbumin och 0,05 procent saponin i 10 minuter och behandlades sedan med de olika antikropparna i 20-30 minuter vid en tid. Mowiol är där täckglasen monterades. TCS konfokalmikroskopi användes för provanalysen (Leica, Heidelberg, FRG). Före fixering involverade vissa experiment inkubering av celler i RPMI innehållande 4 mM akrylamid under 16 timmar (Eckert, 1985; Olink-Coux et al., 1992).
Behandling med N-etylmaleimid (NEM)
Efter att ha inkuberat humana fibroblaster i odlingsmedia vid 37°C i 30 minuter behandlade vi dem med 1 mM NEM i PBS i 15 minuter på is, följt av 2 mM ditiotreitol (DTT) i PBS under ytterligare 15 minuter på is, eller med 1 mM NEM + 2 mM DTT i PBS i 30 minuter på is. Triton X-100 (1%), 50 mM Tris (pH 8,0), 150 mM NaCl (pH 8,0), 5 mM EDTA (pH 8,0) och en proteashämmarecocktail användes för att lysera cellerna (Sigma).
Efter 30 minuters centrifugering vid 100 000 g separerades extraktet i en Triton X-100 olöslig fraktion och en löslig fraktion. Från Triton X-100 lösliga fraktionen användes antikroppsbelagda magnetiska pärlor för immunfällning (Dynal, Oslo, Norge)
